Садржај
Хемијска једињења цетилтриметиламонијум бромид, хексадецилтриметиламонијум бромид, палмитилтриметиламонијум бромид и цетримонијум бромид су такође познати од стране ЦТАБ. Хемикалија се користи као пХ одржавалац у ДНК секвенцијалном геному, посебно у биљкама.
Формула ЦТАБ
Количине формула различитих ЦТАБ хемикалија се разликују у зависности од лабораторије. Међутим, сви састојци укључују 1 М Трис ХЦл пХ 8,0, 0,5 М ЕДТА, 5 М НаЦл и Х20 (понекад два пута дестилован). За ЦТАБ компоненту, неке лабораторије користе цетилтриметиламонијум бромид и друге хексадецилтриметиламонијум бромид.
Припрема биљних ткива
Припрема биљног ткива може варирати, у зависности од материјала. Зидови и ћелијске мембране морају бити разбијени да би се добио приступ нуклеарном материјалу без икакве деградације. Нормално, код мљевења, биљни материјал са течним азотом омогућава приступ ДНК, чувајући штетне ћелијске ензиме и неактивне хемикалије.
Суспензија и центрифугирање
Дробљено ткиво се ставља на ЦТАБ оштрицу и убацује у посуду са текућом водом. Затим се помеша са хлороформом и центрифугира да се одвоје растворљиви протеини и други материјали. ДНК се затим исталожи из водене фазе и пажљиво испере да би се уклониле контаминирајуће соли. Пречишћена ДНК се затим повлачи и чува на слајду ТЕ или у стерилној дестилованој води.